第十題,實驗設(shè)計題。請同學們閱讀一篇材料。
核酸限制性內(nèi)切酶是重組dna技術(shù)中最重要的工具酶之一,它是一類能識別雙鏈dna中特定堿基序列,內(nèi)切方式水解dna鏈的核酸水解酶。最適合基因工程操作的限制內(nèi)切酶為第二類內(nèi)切酶,這類酶的一個重要特點是切割的斷裂點都在反轉(zhuǎn)重復序列上,亦稱回文式序列,如:
ecori
5’-g↓aattc-3’
3’-cttaa↑g-5’
bamhi
……
請設(shè)計一個質(zhì)粒dna的限制性內(nèi)切酶酶解鑒定實驗。
‘還好我做過核酸的其他實驗,這個核酸限制性內(nèi)切酶的實驗設(shè)計,編吧!’
蘭杰并沒有親手做過限制性內(nèi)切酶的實驗,他也很想做啊,然而限制內(nèi)切酶是昂貴的生化試劑,教練不給他做。
這個時候,蘭杰只能依靠類似實驗的操作經(jīng)歷及豐富的理論知識儲備,進行合理的編排。
第一步,酶切反應(yīng)。
第二步,電泳凝膠板的制備。
第三步,電泳加樣。
第四步,電泳與鑒定。
蘭杰首先設(shè)計出四個主要的實驗步驟。
需要的實驗材料包括:質(zhì)粒dna、反應(yīng)緩沖液、bsa、限制性內(nèi)切酶……
需要的實驗器材包括:電泳槽與電泳儀、紫外檢測儀、電熱恒溫水浴箱……
然后就是細化每一個步驟,寫出具體的實驗操作細節(jié)。
‘設(shè)計完了,理論上應(yīng)該是可行的?!?br/> 蘭杰從頭到尾檢查一遍試卷,剛檢查完,鈴聲響起,交卷。
明天將進行實驗考試,雷天剛對他的隊員們說:“理論考試自我感覺良好的同學,可以和我們教練團隊溝通一下理論考試的情況。自我感覺一般的同學,你們回宿舍好好休息,調(diào)整狀態(tài),積極備戰(zhàn)明天的實驗考試?!?br/> 雷天剛說罷,有一半的隊員回去休息了,剩下的一半隊員跟教練們對答案。
“對對對!我是這么寫的!”
“哈哈!我又做對一題!”
“?。垮e了?”
“又錯了?”
“第六題之后,我全錯?”
“我特么心態(tài)崩了?。 ?br/> ……
在競賽尚未全部結(jié)束的時候?qū)Υ鸢?,存在一定風險。
自我感覺良好的同學對完答案后發(fā)現(xiàn)準確率較高,他們的自我感覺當然會更加良好,信心和士氣倍增,有利于明日的實驗賽。
反之則炸裂。
“這么看來,我的理論分數(shù)不會低于95分?”對完理論題的答案之后,蘭杰發(fā)現(xiàn)他的感覺蠻準確的啊,如果能獲得不低于理論分95%的分值,就非??捎^。
“而我的理論分不會高于50分,我撲街了,我不想?yún)⒓訉嶒炠惲恕备叨哪澄魂爢T唉聲嘆氣,心情極為低落。
能入選羊中生競隊的學生都是生物領(lǐng)域的尖子生,正常情況下,這些尖子生交了卷,在沒有對答案之前,對于自己分數(shù)的估值基本上是八九不離十。
對完答案,實際值是預期值的80%~90%,這很常見,大部分學生的估分準確率在這個區(qū)間內(nèi)。
估90分,考了30分?;蛘吖?0分,考了90分。這兩種極端情況都很少見。
羊中生競隊的這位高二學生考完了理論題,自我感覺極其良好,他自我感覺能考到90分,對完答案后發(fā)現(xiàn),他的實際值有很大概率不會超過50分。